使用硫化氢电极监测子宫肌瘤患者血浆中H₂S浓度的变化，是一种研究H₂S与疾病关联的有效方法。以下是关键步骤和注意事项：


1.样本前处理


抗凝处理：采集血浆时使用肝素或EDTA抗凝，避免溶血（红细胞内含H₂S会影响结果）。


快速处理：H₂S易挥发且易被氧化，样本需在采集后30分钟内离心（4°C，3000 rpm，10分钟），分离血浆后立即测定或-80°C保存（短期可-20°C）。


缓冲液添加：测定前用碱性缓冲液（如pH 9.0的Tris-HCl）稳定H₂S，减少挥发。


2.电极校准


标准溶液配制：用Na₂S或NaHS配制H₂S标准液（如0.1μM~100μM），现配现用（溶于脱氧去离子水或缓冲液）。


校准曲线：在相同温度下（如25°C）绘制电极响应曲线（mV vs.log[H₂S]），确保线性（R²>0.99）。


3.测定步骤


温度控制：全程在恒温（如25°C）下操作，避免温度波动影响电极灵敏度。


反应体系：将血浆样本与等体积缓冲液混合，插入电极，待读数稳定（通常2~5分钟）。


干扰排除：


抗氧化剂：加入抗坏血酸（1 mM）抑制H₂S氧化。


金属离子：用EDTA（0.1 mM）螯合金属离子（如Cu²⁺、Fe³⁺）。


4.数据分析


浓度计算：根据校准曲线将电极响应值转换为[H₂S]。


对照组设置：需匹配健康人群或非肌瘤患者的血浆样本，排除个体差异。


统计方法：采用t检验或ANOVA比较组间差异，考虑年龄、月经周期等混杂因素。


5.注意事项


电极维护：使用后用去离子水清洗，长期不用时干燥保存。


质量控制：每批样本加入高/低浓度质控品，确保电极稳定性。


交叉验证：可辅以亚甲基蓝法或荧光探针法验证结果。


6.预期结果与意义


子宫肌瘤患者：可能显示血浆H₂S浓度降低（与正常组相比），因H₂S的抗增殖和血管舒张作用可能与肌瘤生长抑制相关。


研究价值：为探索H₂S作为疾病标志物或治疗靶点提供依据。