讨论


本研究首次证明胎儿绒毛膜能够产生硫化氢，产硫化氢酶CBS和CSE定位于绒毛膜滋养细胞中。CBS和CSE表达以及硫化氢产生速率在足月和早产分娩期间下调。miR-199a和miR-26b参与内源性硫化氢刺激绒毛膜滋养细胞中PGDH表达和活性。


已报道多种因素，包括类固醇激素和细胞因子，参与绒毛膜PGDH表达的调节。已显示肿瘤坏死因子-α抑制培养绒毛膜滋养细胞中PGDH表达。然而，孕酮和皮质醇对PGDH表达表现出相反的效应。我们先前的研究表明，促肾上腺皮质激素释放激素和过氧化物酶体增殖物激活受体在妊娠期间绒毛膜PGDH调节中发挥关键作用。此外，我们还证明PGDH表达降低与过氧化物酶体增殖物激活受体-γ表达降低以及糖皮质激素受体和孕酮受体A表达增加相关。


在此，局部产生的硫化氢增加了绒毛膜中PGDH表达，且PGDH表达与绒毛膜中产硫化氢酶的表达水平相关。综上所述，这表明PGDH表达水平受绒毛膜内分子网络的控制。此外，可能暗示不平衡的分子网络导致PGDH表达上调或下调。为支持这一理论，PTL患者绒毛膜中产硫化氢酶水平降低，这可能表明硫化氢生成减少导致早产分娩。


如前所述，人类妊娠组织，包括胎盘、胎膜和子宫肌层，表达产硫化氢酶CBS和CSE。我们先前显示子宫肌层中CSE和CBS表达在分娩期间下调。一致地，绒毛膜中CBS和CSE表达水平在分娩开始后显著降低。在子宫肌条模型和培养子宫肌细胞模型中，我们已证明硫化氢抑制子宫肌收缩，并抑制收缩相关蛋白的表达，包括催产素受体、连接蛋白-43和PG H合酶-2。有趣的是，本研究暗示硫化氢通过刺激绒毛膜中PGDH表达在控制到达子宫肌层的活性PG量方面发挥重要作用。总之，这表明硫化氢是妊娠期间维持子宫静止的关键因素之一。


在此，硫化氢主要由CBS产生，因为CBS抑制剂和siRNA逆转了L-半胱氨酸的效应；相反，CSE抑制剂和siRNA未逆转该效应。一致地，CBS而非CSE水平与绒毛膜中PGDH表达相关。CBS和CSE产生的硫化氢对PGDH表达产生差异效应的机制尚不清楚。然而，CBS和CSE可以产生不同的产物；此外，它们可以产生硫化氢。因此，不能排除CSE和CSE的其他产物对PGDH表达的影响。有趣的是，Ning等人最近显示CBS和CSE在输卵管胚胎运输中具有差异作用，尽管硫化氢供体对输卵管收缩显示调节效应。


我们先前的研究表明硫化氢可以调节胎盘滋养细胞中各种miRNAs的表达，包括miR-20a、miR-20b、miR-200c和miR-133b。硫化氢对各种miRNAs的表达产生差异效应。硫化氢抑制胎盘中miR-20a、miR-20b和miR-200c的表达，而刺激miR-133b表达。本研究表明硫化氢抑制绒毛膜滋养细胞中miR-26b和miR-199a表达，表明硫化氢是调节miR-26b和miR-199a表达的因素之一。硫化氢生物学作用的潜在分子机制在很大程度上仍不清楚。已暗示硫化氢可以诱导各种蛋白质中半胱氨酸残基的S-硫化氢化和两个半胱氨酸残基的二硫键。因此，研究硫化氢是否诱导控制miRNAs表达的蛋白质的功能变化是有意义的。在绒毛膜中未发现CBS或PGDH与miR-26b或miR-199a之间的显著相关性。然而，这些数据并不表明miR-26b和miR-199a不是介导体内硫化氢调节PGDH表达的关键因素。PGDH可能是这些miRNAs的靶标之一，因为每个miRNA有多个靶标。此外，我们先前的研究表明PGDH表达受多种因素调节。因此，负责PGDH表达的调节机制仍有待进一步阐明。


总之，局部产生的内源性硫化氢增强人类绒毛膜滋养细胞中PGDH表达。硫化氢是妊娠期间维持绒毛膜中PGDH表达的关键因素之一。硫化氢产生减少导致分娩期间绒毛膜中PGDH表达降低。