用连接pH计的pH微电极(Unisense)测量内源性和移植胰岛的组织pH值。电极在已知pH值的缓冲液(9.088±0.001、7.386±0.001、6.974±0.001和6.841±0.001)中于37℃进行了四点校准。初步实验评估了电极在体内使用时的灵敏度和稳定性，发现电极的pH值漂移为0.005个单位/小时，灵敏度为0.003个pH单位。在体视显微镜下用微电极推进器将pH电极(尖端外径10μm)插入组织中。每只动物在移植的胰岛和周围的肾皮质中进行了5次pH值测量。在距离组织表面不同的深度(250、500、750μm)进行记录。在对照组动物的胰腺中，对3-5个浅表胰岛和周围的外分泌实质进行测量。通常在同一胰岛内进行多次测量；计算平均值以获得一个胰岛的pH值。计算每个组织和动物的所有测量值的平均值，并将其视为一次实验。

电极测量期间，血压、体温和组织温度通过连接到Power Macintosh 6100计算机的MacLab仪器持续记录。实验结束时，从股动脉导管中抽取动脉血样本用于分析血细胞比容(Hct)和血气，并收集在微量血细胞比容管中。

移植物胰岛素含量。将胰岛移植物剥离，放入1.0毫升酸性乙醇[0.18M HCl溶于95%(体积分数)乙醇]中。对移植物进行超声处理以破坏胰岛细胞，然后在4℃下提取样本过夜，接着用ELISA(大鼠胰岛素ELISA)测定胰岛素含量。

体外生成乳酸和丙酮酸。将从1个月大的胰岛移植物(见上段)中提取的20个胰岛或新鲜分离的对照胰岛重复分组，置于密封的玻璃瓶中，在37℃温度下，在250升含2mg/ml白蛋白和5.6mmol/l D-葡萄糖的克雷布斯-林格碳酸氢盐缓冲液(含HEPES)中培养。每次实验的培养基在培养前都用5%CO2空气(标准培养条件)或1%O2-94%N2-5%CO2饱和。培养2小时后移除培养基，保存在20℃温度下直至分析。乳酸和丙酮酸的浓度用微量透析分析仪测量，该分析仪使用酶试剂并在546纳米波长下进行比色测量。不含胰岛的培养液用作空白对照。

统计分析。所有数值均以平均值(SE)表示。数据间的多重比较采用方差分析和Bonferroni后检验。相关性分析采用简单线性回归法。所有比较均以P0.05为具有统计学意义。由于pH值的对数标度不允许进行参数统计评估，因此在计算平均值SEs之前，所有记录的pH值都转换成了氢离子浓度。不过，为了便于解释数据，这些数据以相应的pH值表示。

结果

体重和血糖浓度。所有血糖正常的供体和受体在进行胰岛移植时的体重均为325克(表1)。因注射STZ而患糖尿病的动物体重也是325克，但直到3-4天后进行胰岛移植时，它们的体重下降了10%。移植后，血糖正常的动物体重缓慢增加，而糖尿病动物在移植后第一周体重下降，此后体重稳定在移植前体重的80%。所有非糖尿病动物的血糖浓度均为4-6毫摩尔/升。所有经STZ处理的动物在进行组织pH和Po2测量时仍有糖尿病。

移植物胰岛素含量。糖尿病动物的胰岛移植物在移植后1天和1个月的胰岛素含量均低于非糖尿病受体的移植物(表1)。所有胰岛移植物(即非糖尿病受体和糖尿病受体的移植物)的胰岛素含量在移植后1天至1个月期间均有所下降。

动脉血压、血脂、动脉Po2和pH值。所有动物的平均动脉血压均为100mmHg(表1)。Hct值介于42%和51%之间，正常血糖动物和高血糖动物之间没有差异。同样，各组之间的动脉血Po2和动脉血pH值也没有差异。

组织pH和Po2。在内源性胰岛中，组织的平均pH值与动脉血中的pH值相似(图1)。移植胰岛的组织pH值明显较低。在非糖尿病动物和糖尿病动物的胰岛移植中，以及在移植后1天或1个月进行调查时，都记录到了相似的pH值。移植物不同位置的pH值没有差异(数据未显示)。植入胰岛移植物附近的外分泌胰腺和肾皮质的组织pH值(图2)与内源性胰岛和动脉血的pH值相似。

内源性胰岛的平均Po2为35mmHg(图3)。移植后1天和1个月时，移植胰岛的组织Po2明显低于内源性胰岛。非糖尿病受者和糖尿病受者的胰岛移植物在两个时间点的Po2差异均无统计学意义。非糖尿病受者胰岛移植物组织Po2的下降在移植后1天和1个月之间加剧。然而，糖尿病受者中却看不到这种差异。移植物不同位置的Po2没有差异(数据未显示)。在胰腺外分泌实质中，平均组织Po2为25-30mmHg(图4)。非糖尿病动物和糖尿病动物肾皮质中的Po2均为20mmHg。糖尿病动物1个月大的胰岛移植组织Po2与氢离子浓度之间存在统计学意义上的显著负相关(图5)，但在其他实验组中看不到这种情况。

乳酸-丙酮酸比率。当暴露于标准培养条件(95%空气-5%二氧化碳)时，从胰岛移植物中提取的胰岛培养基中的乳酸-丙酮酸(乳酸/丙酮酸)比率与新鲜分离的对照胰岛培养基中的乳酸/丙酮酸比率相比有所增加(图6)。从暴露于95%空气-5%CO2的取回的小胰岛培养基中获得的乳酸/丙酮酸比率反而与从暴露于缺氧(1%O2)的新鲜分离对照小胰岛培养基中获得的乳酸/丙酮酸比率相似。与所有其他组别相比，从胰岛移植中提取并暴露于缺氧环境的胰岛在培养基中的乳酸/丙酮酸比率明显增加。